文章摘要: ? ? ? PCR實(shí)驗(yàn)室也叫基因擴(kuò)增實(shí)驗(yàn)室。PCR是聚合酶鏈反應(yīng)的簡(jiǎn)稱。它是一種分子生物學(xué)技術(shù),用于擴(kuò)增特定的DNA,可視為特殊的DNA體外復(fù)制。用于基因檢測(cè),具有靈敏度高、特異性強(qiáng)、快速、簡(jiǎn)便等特色。它可以將傳統(tǒng)方法難以檢測(cè)到的較少數(shù)病毒DNA擴(kuò)增一百萬(wàn)倍以
? ? ? PCR實(shí)驗(yàn)室也叫基因擴(kuò)增實(shí)驗(yàn)室。PCR是聚合酶鏈反應(yīng)的簡(jiǎn)稱。它是一種分子生物學(xué)技術(shù),用于擴(kuò)增特定的DNA,可視為特殊的DNA體外復(fù)制。用于基因檢測(cè),具有靈敏度高、特異性強(qiáng)、快速、簡(jiǎn)便等特色。它可以將傳統(tǒng)方法難以檢測(cè)到的較少數(shù)病毒DNA擴(kuò)增一百萬(wàn)倍以上,從而大大提高疾病的診斷水平。它不僅可以用于基因分離、克隆和核酸序列分析等基礎(chǔ)研究,還可以用于疾病診斷或任何有DNA和RNA的地方,也稱為無(wú)細(xì)胞分子克隆或特異性DNA序列體外引物定向酶促擴(kuò)增技術(shù)。
? ? ? 1.聚合酶鏈反應(yīng)實(shí)驗(yàn)室的布局。
? ? ? 聚合酶鏈反應(yīng)擴(kuò)增實(shí)驗(yàn)室原則上分為三個(gè)獨(dú)立的工作區(qū):試劑儲(chǔ)存與制備區(qū)、標(biāo)本制備區(qū)、擴(kuò)增與擴(kuò)增產(chǎn)物分析區(qū)。為了避免交叉污染,進(jìn)入每個(gè)工作區(qū)嚴(yán)格遵循一個(gè)單一的方向,即只能從試劑儲(chǔ)存和制備區(qū)到標(biāo)本制備區(qū),再到擴(kuò)增和擴(kuò)增產(chǎn)物分析區(qū)。試劑和樣品在實(shí)驗(yàn)區(qū)之間的轉(zhuǎn)移應(yīng)通過(guò)轉(zhuǎn)移窗口進(jìn)行。
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? ? ? 2.PCR實(shí)驗(yàn)室實(shí)驗(yàn)室空調(diào)通風(fēng)系統(tǒng)的設(shè)計(jì)及壓力控制。
? ? ?聚合酶鏈反應(yīng)實(shí)驗(yàn)室對(duì)凈化水平?jīng)]有嚴(yán)格要求,但為了避免實(shí)驗(yàn)區(qū)之間交叉污染的可能性,建議采用全輸送、全排放的氣流組織形式。同時(shí),要嚴(yán)格控制送風(fēng)和排風(fēng)的比例,以保證各個(gè)實(shí)驗(yàn)區(qū)的壓力要求。
? ? ?(1)試劑儲(chǔ)存和制備區(qū)。
? ? ?PCR實(shí)驗(yàn)室的主要操作是貯存試劑的制備、試劑的分裝和主反應(yīng)混合物的制備。用于樣品制備的試劑和材料應(yīng)直接運(yùn)輸?shù)皆搮^(qū)域,不得通過(guò)其他區(qū)域。試劑原料存放在該區(qū)域,所需存放的試劑在該區(qū)域準(zhǔn)備。為了控制氣壓,這個(gè)區(qū)域要對(duì)外界保持輕微的正壓。
? ? ? (2)標(biāo)本制備區(qū)。
? ? ? PCR實(shí)驗(yàn)室領(lǐng)域的主要操作是樣品保存、核酸(RNA和DNA)的提取和儲(chǔ)存、擴(kuò)增反應(yīng)管的添加和DNA合成的測(cè)定。要求該區(qū)域的壓力梯度相對(duì)于鄰近區(qū)域?yàn)檎?,以避免氣溶膠污染從鄰近區(qū)域進(jìn)入該區(qū)域。此外,采樣操作過(guò)程當(dāng)中可能會(huì)出現(xiàn)氣溶膠污染,因此應(yīng)避免在該區(qū)域進(jìn)行不必要的行走。
? ? ?(3)擴(kuò)增和擴(kuò)增產(chǎn)物分析區(qū)。
? ? ? 該領(lǐng)域的主要操作是DNA擴(kuò)增和擴(kuò)增片段的測(cè)定。此外,將制備好的DNA模板加入(從樣品制備區(qū))和將主反應(yīng)混合物制備到反應(yīng)混合物中(從試劑儲(chǔ)存和制備區(qū))也可以在該區(qū)域進(jìn)行。PCR實(shí)驗(yàn)室區(qū)域的壓力梯度需要相對(duì)于鄰近區(qū)域的負(fù)壓,以避免氣溶膠從該區(qū)域泄漏。為了避免氣溶膠造成的污染,應(yīng)該盡
PCR實(shí)驗(yàn)室布局及通風(fēng)系統(tǒng)設(shè)計(jì)探討
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