文章摘要: PCR實(shí)驗(yàn)室的設(shè)計(jì)需要?jiǎng)澐謪^(qū)域。具體來(lái)說(shuō),PCR實(shí)驗(yàn)室可分為4個(gè)區(qū)域,即:試劑儲(chǔ)存與制備區(qū)、標(biāo)本制備區(qū)、擴(kuò)增反應(yīng)混合物制備與擴(kuò)增區(qū)、擴(kuò)增產(chǎn)物分析區(qū)。先簡(jiǎn)單介紹一下PCR實(shí)驗(yàn)室,也叫“基因擴(kuò)增實(shí)驗(yàn)室”。 所謂“PCR”只是英文的縮寫(xiě),意思是聚合酶鏈反應(yīng)。PCR是
PCR實(shí)驗(yàn)室的設(shè)計(jì)需要?jiǎng)澐謪^(qū)域。具體來(lái)說(shuō),PCR實(shí)驗(yàn)室可分為4個(gè)區(qū)域,即:試劑儲(chǔ)存與制備區(qū)、標(biāo)本制備區(qū)、擴(kuò)增反應(yīng)混合物制備與擴(kuò)增區(qū)、擴(kuò)增產(chǎn)物分析區(qū)。先簡(jiǎn)單介紹一下PCR實(shí)驗(yàn)室,也叫“基因擴(kuò)增實(shí)驗(yàn)室”。 所謂“PCR”只是英文的縮寫(xiě),意思是聚合酶鏈反應(yīng)。PCR是一種分子生物學(xué)技術(shù),通過(guò)它可以擴(kuò)增特定的DNA的片段,就像在體外進(jìn)行特殊的DNA復(fù)制一樣。通過(guò)PCR實(shí)驗(yàn)室的實(shí)驗(yàn),可以快速掌握供試品中的雜質(zhì)含量,其準(zhǔn)確度高達(dá)納米級(jí)。
PCR實(shí)驗(yàn)室設(shè)計(jì)區(qū)域劃分:
1、試劑儲(chǔ)存和配制區(qū):該區(qū)的功能是存放試劑的配制、試劑的分裝、主反應(yīng)液的配制。注意實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目中使用的材料,如試劑與試劑原料、標(biāo)本與標(biāo)本原料等,需要存放在該區(qū)域。至于是否需要控制氣流壓力,這方面PCR實(shí)驗(yàn)室沒(méi)有嚴(yán)格要求。
2、標(biāo)本制備區(qū):PCR實(shí)驗(yàn)室該區(qū)的功能是臨床標(biāo)本的保存、核酸的提取和儲(chǔ)存、擴(kuò)增反應(yīng)管中核酸的加入以及測(cè)量RNA時(shí)DNA的合成。預(yù)防措施是避免相鄰區(qū)域的空氣進(jìn)入該區(qū)域,壓力梯度應(yīng)設(shè)置為與相鄰區(qū)域相比為正壓。工作人員在進(jìn)行實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目操作時(shí),應(yīng)避免不必要的走動(dòng),避免加樣操作過(guò)程當(dāng)中出現(xiàn)氣溶膠污染。
3、擴(kuò)增反應(yīng)混合物制備和擴(kuò)增區(qū):PCR實(shí)驗(yàn)室該區(qū)的作用是擴(kuò)增DNA,使制備的實(shí)驗(yàn)試劑成為反應(yīng)混合物。注意實(shí)驗(yàn)放大的污染指數(shù)比較高,壓力梯度要設(shè)置為與相鄰區(qū)域相比為負(fù)壓。這樣做的好處是可以有效避免氣溶膠從PCR實(shí)驗(yàn)室的該區(qū)域泄漏。
4、擴(kuò)增產(chǎn)物分析區(qū):PCR實(shí)驗(yàn)室該區(qū)的作用是確定相關(guān)的擴(kuò)增片段。要注意的是,如果PCR實(shí)驗(yàn)室設(shè)計(jì)中已經(jīng)預(yù)設(shè)了全自動(dòng)封閉式分析儀器,則無(wú)需劃分該區(qū)域。與相鄰區(qū)域相比,該區(qū)域的壓力梯度應(yīng)設(shè)置為負(fù)壓。這樣做的好處是可以有效避免擴(kuò)增產(chǎn)物擴(kuò)散到其他區(qū)域。
PCR實(shí)驗(yàn)室設(shè)計(jì)的區(qū)域劃分
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