ATCC 作為全球知名的菌種保藏機構(gòu)，對提供菌種保藏服務有嚴格的要求，主要包括以下方面：
機構(gòu)與人員資質(zhì)
合法注冊的機構(gòu)：申請保藏服務的單位必須是合法注冊的科研機構(gòu)、企業(yè)或其他組織，需提供相關的注冊證明文件，如營業(yè)執(zhí)照、組織機構(gòu)代碼證等（高校和研究所一般不需要提供營業(yè)執(zhí)照）。
生物安全資質(zhì)：保藏機構(gòu)需要具備相應的生物安全實驗室資質(zhì)。例如，提供所在地衛(wèi)生健康行政部門頒發(fā)的病原微生物實驗室生物安全等級證書。如果沒有，需填寫 ATCC 指定的生物安全實驗室資質(zhì)說明，并加蓋單位公章。
專業(yè)技術人員：保藏服務需要有專業(yè)的技術人員來操作和管理，這些人員應具備微生物學、細胞生物學等相關專業(yè)知識，熟悉菌種保藏的技術和流程，并且經(jīng)過相關的培訓和考核。
保藏設施與條件
合適的保藏設備：需要配備液氮罐、凍干機等專業(yè)的保藏設備，以滿足不同菌種的保藏需求。液氮罐用于超低溫保存，能使菌種處于休眠狀態(tài)，保持其生物學特性；凍干機則用于將菌種制成凍干品，便于長期保存和運輸。
穩(wěn)定的環(huán)境條件：保藏場所要保持穩(wěn)定的溫度、濕度和通風條件，避免溫度波動、潮濕和空氣污染等因素對菌種造成影響。同時，要具備防火、防盜、防鼠等安全措施，確保菌種的安全保藏。
質(zhì)量檢測與監(jiān)控設備：需要有相應的設備來對保藏的菌種進行定期的質(zhì)量檢測和監(jiān)控，如顯微鏡、培養(yǎng)箱、離心機、生化分析儀等，以便及時發(fā)現(xiàn)菌種的污染、變異等問題。
材料與文件準備
申請表：填寫 ATCC 的新帳戶申請表，以英文填寫，單位負責人及生物安全負責人簽字，并加蓋單位紅章。
MTA 協(xié)議：按照要求簽署材料轉(zhuǎn)讓協(xié)議（MTA），明確規(guī)定 ATCC 菌種的使用范圍和限制，如只能用于科學研究，不能應用于人體，未經(jīng)許可不得用于商業(yè)用途等。
其他條件
遵守法律法規(guī)：保藏機構(gòu)必須遵守美國以及所在國家或地區(qū)的相關法律法規(guī)，包括生物安全法規(guī)、進出口管制法規(guī)等。對于涉及特殊菌種，如生物安全四級（BSL - 4）病原體，還需要申請專門的許可證。
費用支付：需要按照 ATCC 的規(guī)定支付相應的保藏費用，費用標準根據(jù)菌種的類型、保藏方式和服務內(nèi)容等因素而定。

ATCC（美國模式培養(yǎng)物集存庫）標準菌株的存儲條件通常取決于菌株的特性，但一般常見的存儲方法和條件如下：

1. 冷凍保存：
- 液氮（-196℃）：這是長期保存菌株的常用方法，能最大程度保持菌株的活性和穩(wěn)定性。
- 超低溫冰箱（-80℃）：也能有效保存菌株，但保存時間可能相對液氮較短。

2. 低溫冷藏：
- 一般在 2 - 8℃的冰箱中，適用于一些短期保存或?qū)囟纫蟛惶叩木辍?br />
在存儲菌株時，通常會使用特定的保護劑，如甘油或脫脂牛奶等，以減少冷凍和復蘇過程對菌株的損傷。同時，菌株的保存容器要經(jīng)過嚴格的滅菌處理，并且做好標記和記錄，包括菌株的名稱、編號、保存日期等信息。

評估復合細胞模型穩(wěn)定性可從細胞特性、功能、分子水平及環(huán)境因素等方面進行，以下是具體的評估方法：
細胞特性評估
細胞形態(tài)觀察：通過顯微鏡定期觀察復合細胞模型中各種細胞的形態(tài)。如在腫瘤復合細胞模型中，觀察腫瘤細胞與基質(zhì)細胞的形態(tài)是否保持典型特征，有無異常變化，若細胞形態(tài)穩(wěn)定，提示細胞模型在外觀上保持穩(wěn)定。
細胞生長曲線測定：繪制復合細胞模型中各類細胞的生長曲線，連續(xù)監(jiān)測細胞在不同時間點的數(shù)量變化。若生長曲線呈現(xiàn)穩(wěn)定的對數(shù)增長期、平臺期等特征，且多次重復實驗結(jié)果相似，說明細胞生長狀態(tài)穩(wěn)定，細胞模型在生長特性方面較為穩(wěn)定。
細胞活力檢測：采用臺盼藍染色、MTT 法、CCK - 8 法等檢測細胞活力。以 MTT 法為例，在相同培養(yǎng)條件下，定期檢測復合細胞模型中細胞的吸光度值，若吸光度值穩(wěn)定，表明細胞活力穩(wěn)定，細胞模型整體狀態(tài)穩(wěn)定。
細胞功能評估
特定功能檢測：依據(jù)復合細胞模型的類型和研究目的，檢測細胞的特定功能。如在肝臟復合細胞模型中，檢測肝細胞的代謝功能，包括對藥物、毒素的代謝轉(zhuǎn)化能力；在神經(jīng)細胞復合模型中，檢測神經(jīng)元的電生理活動，如動作電位的發(fā)放等，若這些功能指標在多次檢測中保持穩(wěn)定，說明細胞模型的功能穩(wěn)定。
細胞間相互作用監(jiān)測：觀察復合細胞模型中不同細胞間的相互作用。例如在腫瘤微環(huán)境復合細胞模型中，通過免疫熒光染色等方法檢測腫瘤細胞與免疫細胞之間的信號傳導分子表達情況，若細胞間相互作用的相關指標穩(wěn)定，表明細胞模型中細胞間的關系和功能穩(wěn)定。
分子水平評估
基因表達分析：運用實時定量 PCR、基因芯片等技術檢測與細胞功能、表型相關的關鍵基因表達水平。在心肌細胞復合模型中，檢測心肌特異性基因如肌鈣蛋白、肌球蛋白等的表達，若這些基因的表達量在一定范圍內(nèi)波動且保持相對穩(wěn)定，說明細胞模型在基因表達層面穩(wěn)定。
蛋白質(zhì)表達檢測：采用 Western blotting、免疫組化等方法檢測關鍵蛋白質(zhì)的表達和定位。在皮膚復合細胞模型中，檢測角蛋白、膠原蛋白等蛋白質(zhì)的表達情況，若蛋白質(zhì)表達水平和定位穩(wěn)定，反映出細胞模型在蛋白質(zhì)水平的穩(wěn)定性。
環(huán)境因素評估
培養(yǎng)條件穩(wěn)定性：保持培養(yǎng)條件的一致性，包括培養(yǎng)基成分、溫度、濕度、氣體環(huán)境等。定期檢測培養(yǎng)箱的溫度、二氧化碳濃度等參數(shù)，確保其在設定范圍內(nèi)波動，同時監(jiān)測培養(yǎng)基的 pH 值、營養(yǎng)成分含量等，若培養(yǎng)條件穩(wěn)定，有助于維持復合細胞模型的穩(wěn)定性。
批次間一致性：對于多次構(gòu)建的復合細胞模型，進行批次間的比較分析。檢測不同批次細胞模型的細胞特性、功能、分子水平等指標，若各批次間的差異較小，說明細胞模型具有良好的批次間穩(wěn)定性，可重復性高。