"ATCC 保藏中心對(duì)標(biāo)準(zhǔn)菌株的來(lái)源確認(rèn)主要通過(guò)以下方式：
嚴(yán)格的采集與捐贈(zèng)流程
原始采集：對(duì)于從自然界或臨床等原始環(huán)境中采集的菌株，ATCC 有嚴(yán)格的采集規(guī)范和記錄。采集人員會(huì)詳細(xì)記錄采集的時(shí)間、地點(diǎn)、樣本來(lái)源（如患者信息、環(huán)境描述等）等信息，這些記錄構(gòu)成了菌株來(lái)源的原始依據(jù)。
捐贈(zèng)與轉(zhuǎn)讓：許多菌株是由科研機(jī)構(gòu)、醫(yī)院、企業(yè)等捐贈(zèng)給 ATCC 的。捐贈(zèng)方需要提供菌株的詳細(xì)背景信息，包括菌株的分離來(lái)源、鑒定過(guò)程、前期研究和使用情況等資料，ATCC 會(huì)對(duì)這些信息進(jìn)行嚴(yán)格審核和歸檔。
詳細(xì)的歷史記錄追溯
檔案建立：ATCC 為每一株標(biāo)準(zhǔn)菌株建立了詳細(xì)的檔案，從菌株進(jìn)入保藏中心開始，其每一步的處理、保存、傳代、分發(fā)等信息都會(huì)被記錄在案。檔案中還包括菌株的原始來(lái)源信息、捐贈(zèng)者或采集者的信息等，確保可以通過(guò)檔案追溯到菌株的最初來(lái)源。
記錄更新：隨著菌株在保藏中心的流轉(zhuǎn)和使用，相關(guān)記錄會(huì)不斷更新，如每次傳代的時(shí)間、操作人員、傳代次數(shù)、質(zhì)量檢測(cè)結(jié)果等。這些詳細(xì)且連續(xù)的記錄為菌株來(lái)源的確認(rèn)提供了有力的證據(jù)，保證了菌株來(lái)源的可追溯性。
權(quán)威的鑒定與認(rèn)證
初始鑒定：菌株在進(jìn)入 ATCC 保藏中心時(shí)，會(huì)經(jīng)過(guò)嚴(yán)格的鑒定流程，采用多種先進(jìn)的鑒定技術(shù)，如基因測(cè)序、生理生化特性分析、血清學(xué)鑒定等，確定菌株的種屬、亞種甚至更精確的分類地位。這些鑒定結(jié)果與菌株的來(lái)源信息相互印證，進(jìn)一步確認(rèn)菌株的身份和來(lái)源的準(zhǔn)確性。
定期復(fù)核：ATCC 會(huì)定期對(duì)保藏的標(biāo)準(zhǔn)菌株進(jìn)行復(fù)核鑒定，以確保菌株的特性和分類地位沒有發(fā)生變化。如果發(fā)現(xiàn)菌株的特性與原始記錄不符，會(huì)進(jìn)一步追溯原因，確認(rèn)是否是由于保存條件、傳代等因素導(dǎo)致的變異，還是菌株來(lái)源存在問(wèn)題。
與國(guó)際機(jī)構(gòu)合作與比對(duì)
國(guó)際交流：ATCC 積極參與國(guó)際間的菌種保藏合作與交流活動(dòng)，與全球其他權(quán)威的菌種保藏機(jī)構(gòu)共享菌株資源和信息。通過(guò)與其他機(jī)構(gòu)保藏的相同或相似菌株進(jìn)行比對(duì)和驗(yàn)證，進(jìn)一步確認(rèn)菌株來(lái)源的可靠性和準(zhǔn)確性。
標(biāo)準(zhǔn)制定：在國(guó)際微生物學(xué)領(lǐng)域，ATCC 參與相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)的制定和修訂工作。其保藏的標(biāo)準(zhǔn)菌株被廣泛應(yīng)用于全球的科研、教學(xué)和生產(chǎn)領(lǐng)域，成為行業(yè)內(nèi)的標(biāo)準(zhǔn)參考菌株。通過(guò)與國(guó)際標(biāo)準(zhǔn)的接軌和比對(duì)，保證了 ATCC 保藏的標(biāo)準(zhǔn)菌株來(lái)源的權(quán)威性和可信度。


"標(biāo)準(zhǔn)菌株來(lái)源確認(rèn)涉及的資質(zhì)和認(rèn)證較為復(fù)雜，涵蓋機(jī)構(gòu)資質(zhì)、人員資質(zhì)以及相關(guān)認(rèn)證等方面，以下是具體介紹：
機(jī)構(gòu)資質(zhì)
保藏機(jī)構(gòu)資質(zhì)：從事標(biāo)準(zhǔn)菌株保藏的機(jī)構(gòu)通常需要具備相關(guān)資質(zhì)。例如，美國(guó)典型培養(yǎng)物保藏中心（ATCC）等權(quán)威保藏機(jī)構(gòu)，需經(jīng)過(guò)嚴(yán)格的評(píng)估和認(rèn)可，以確保其具備完善的保藏設(shè)施、專業(yè)的技術(shù)人員和科學(xué)的管理體系，能夠保證標(biāo)準(zhǔn)菌株的質(zhì)量和來(lái)源可追溯性。在中國(guó)，如中國(guó)微生物菌種保藏管理委員會(huì)（CCCCM）下屬的各專業(yè)保藏中心，需獲得相關(guān)部門的批準(zhǔn)和監(jiān)管，具備相應(yīng)的保藏條件和能力，方可開展標(biāo)準(zhǔn)菌株的保藏和供應(yīng)業(yè)務(wù)。
檢測(cè)機(jī)構(gòu)資質(zhì)：進(jìn)行標(biāo)準(zhǔn)菌株來(lái)源確認(rèn)的檢測(cè)機(jī)構(gòu)需要具備相應(yīng)的資質(zhì)認(rèn)證。例如，通過(guò)實(shí)驗(yàn)室認(rèn)可，如依據(jù) ISO/IEC 17025《檢測(cè)和校準(zhǔn)實(shí)驗(yàn)室能力的通用要求》獲得認(rèn)可的實(shí)驗(yàn)室，表明其具備按照國(guó)際標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行檢測(cè)的技術(shù)能力和管理水平，能夠準(zhǔn)確地運(yùn)用各種技術(shù)手段對(duì)標(biāo)準(zhǔn)菌株的來(lái)源進(jìn)行確認(rèn)。此外，一些特定領(lǐng)域的檢測(cè)機(jī)構(gòu)還可能需要獲得行業(yè)主管部門的資質(zhì)認(rèn)定，如臨床微生物檢測(cè)實(shí)驗(yàn)室需獲得衛(wèi)生健康部門的批準(zhǔn)，以確保其檢測(cè)結(jié)果在醫(yī)療診斷等領(lǐng)域具有可靠性和權(quán)威性。
人員資質(zhì)
專業(yè)技術(shù)人員資質(zhì)：參與標(biāo)準(zhǔn)菌株來(lái)源確認(rèn)的技術(shù)人員應(yīng)具備相關(guān)專業(yè)背景和資質(zhì)。例如，微生物學(xué)、分子生物學(xué)等相關(guān)專業(yè)的學(xué)歷背景，熟悉微生物分類、鑒定、基因檢測(cè)等技術(shù)。同時(shí)，技術(shù)人員還需具備相應(yīng)的技能證書或培訓(xùn)經(jīng)歷，如通過(guò)專業(yè)技能培訓(xùn)獲得的微生物鑒定技術(shù)培訓(xùn)證書等，以證明其具備開展標(biāo)準(zhǔn)菌株來(lái)源確認(rèn)工作的能力。在一些高端的分子生物學(xué)檢測(cè)技術(shù)方面，技術(shù)人員可能還需要具備基因測(cè)序技術(shù)資格證書等更專業(yè)的資質(zhì)認(rèn)證。
質(zhì)量管理人員資質(zhì)：負(fù)責(zé)標(biāo)準(zhǔn)菌株來(lái)源確認(rèn)過(guò)程中質(zhì)量控制和管理的人員，需要具備質(zhì)量管理方面的知識(shí)和經(jīng)驗(yàn)，熟悉質(zhì)量管理體系和相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)。例如，擁有質(zhì)量管理體系內(nèi)審員證書、質(zhì)量工程師證書等，能夠確保來(lái)源確認(rèn)工作遵循規(guī)范的流程和標(biāo)準(zhǔn)，保證結(jié)果的準(zhǔn)確性和可靠性。
相關(guān)認(rèn)證
質(zhì)量管理體系認(rèn)證：無(wú)論是保藏機(jī)構(gòu)還是檢測(cè)機(jī)構(gòu)，通常需要建立并運(yùn)行有效的質(zhì)量管理體系，并通過(guò)相關(guān)認(rèn)證。如 ISO 9001 質(zhì)量管理體系認(rèn)證，表明機(jī)構(gòu)在管理職責(zé)、資源管理、產(chǎn)品實(shí)現(xiàn)和測(cè)量、分析與改進(jìn)等方面具備完善的管理機(jī)制，能夠保證標(biāo)準(zhǔn)菌株來(lái)源確認(rèn)工作的規(guī)范性和一致性。對(duì)于微生物檢測(cè)實(shí)驗(yàn)室，還可能需要通過(guò) ISO 15189《醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)室 - 質(zhì)量和能力的專用要求》認(rèn)證，針對(duì)醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)室的特殊要求進(jìn)行規(guī)范，確保在臨床診斷等領(lǐng)域標(biāo)準(zhǔn)菌株來(lái)源確認(rèn)的質(zhì)量和可靠性。
溯源體系認(rèn)證：為了確保標(biāo)準(zhǔn)菌株來(lái)源的可追溯性，一些機(jī)構(gòu)可能會(huì)建立溯源體系，并尋求相關(guān)認(rèn)證。例如，依據(jù) GS1 全球追溯標(biāo)準(zhǔn)等建立的溯源系統(tǒng)，通過(guò)對(duì)標(biāo)準(zhǔn)菌株從采集、保藏、檢測(cè)到使用等各個(gè)環(huán)節(jié)進(jìn)行信息記錄和標(biāo)識(shí)，實(shí)現(xiàn)對(duì)菌株來(lái)源的準(zhǔn)確追溯。通過(guò)相關(guān)溯源體系認(rèn)證，可證明機(jī)構(gòu)在菌株來(lái)源確認(rèn)和追溯方面具備完善的能力和管理水平。
不同國(guó)家和地區(qū)對(duì)于標(biāo)準(zhǔn)菌株來(lái)源確認(rèn)的資質(zhì)和認(rèn)證要求可能會(huì)有所差異，具體要求需根據(jù)當(dāng)?shù)氐姆煞ㄒ?guī)、行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)以及相關(guān)機(jī)構(gòu)的規(guī)定來(lái)確定。

"確認(rèn)標(biāo)準(zhǔn)菌株來(lái)源的技術(shù)豐富多樣，涵蓋了傳統(tǒng)的微生物學(xué)方法、先進(jìn)的分子生物學(xué)技術(shù)以及用于記錄和追溯的信息技術(shù)等。以下是具體介紹：
傳統(tǒng)微生物學(xué)方法
形態(tài)學(xué)鑒定：通過(guò)光學(xué)顯微鏡或電子顯微鏡觀察菌株的細(xì)胞形態(tài)、大小、結(jié)構(gòu)、排列方式等特征，如細(xì)菌的球菌、桿菌、螺旋菌形態(tài)，以及真菌的菌絲、孢子形態(tài)等，初步判斷菌株的種類，為來(lái)源確認(rèn)提供基礎(chǔ)信息。
生理生化特性分析：利用菌株對(duì)不同營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的利用能力、代謝產(chǎn)物的產(chǎn)生、酶活性等生理生化反應(yīng)來(lái)鑒定菌株。例如，通過(guò)檢測(cè)菌株對(duì)各種糖類的發(fā)酵能力、對(duì)不同氮源的利用情況，以及是否產(chǎn)生特定的酶類等，與已知標(biāo)準(zhǔn)菌株的生理生化特征進(jìn)行比對(duì)，從而確認(rèn)其來(lái)源。
分子生物學(xué)技術(shù)
基因測(cè)序技術(shù)
16S rRNA 基因測(cè)序：對(duì)于細(xì)菌，16S rRNA 基因具有高度的保守性和特異性，通過(guò)對(duì)其進(jìn)行測(cè)序和分析，可以確定細(xì)菌的屬、種甚至亞種水平的分類地位，從而推斷其來(lái)源。
全基因組測(cè)序：能獲得菌株完整的基因序列信息，通過(guò)與數(shù)據(jù)庫(kù)中已知菌株的全基因組進(jìn)行比對(duì)，可以精確地確定菌株的親緣關(guān)系和來(lái)源，還能發(fā)現(xiàn)菌株特有的基因特征，為來(lái)源確認(rèn)提供更全面的依據(jù)。
DNA 指紋技術(shù)
脈沖場(chǎng)凝膠電泳（PFGE）：將細(xì)菌染色體 DNA 用限制性內(nèi)切酶消化后，通過(guò)脈沖場(chǎng)凝膠電泳分離大片段 DNA，形成獨(dú)特的 DNA 指紋圖譜。不同菌株的 DNA 指紋圖譜具有高度的特異性，通過(guò)比較圖譜的相似性來(lái)判斷菌株之間的親緣關(guān)系和來(lái)源。
隨機(jī)擴(kuò)增多態(tài)性 DNA（RAPD）：利用隨機(jī)引物對(duì)基因組 DNA 進(jìn)行 PCR 擴(kuò)增，產(chǎn)生一系列不同大小的 DNA 片段，通過(guò)電泳分離形成多態(tài)性圖譜。該技術(shù)可快速檢測(cè)菌株基因組的多態(tài)性，用于菌株的鑒別和來(lái)源分析。
其他技術(shù)
血清學(xué)鑒定：利用抗原 - 抗體特異性反應(yīng)，檢測(cè)菌株表面的抗原成分，確定其血清型。不同血清型的菌株可能具有不同的來(lái)源和傳播途徑，因此血清學(xué)鑒定可作為菌株來(lái)源確認(rèn)的輔助手段，尤其在一些病原菌的溯源研究中具有重要作用。
溯源標(biāo)記技術(shù)：在菌株的培養(yǎng)過(guò)程中，可以添加一些具有溯源作用的標(biāo)記物，如穩(wěn)定同位素標(biāo)記或特定的熒光標(biāo)記等。這些標(biāo)記物會(huì)被整合到菌株的細(xì)胞成分中，通過(guò)檢測(cè)標(biāo)記物的存在和特征，可以追蹤菌株的來(lái)源和傳播路徑。
信息技術(shù)：利用信息化管理系統(tǒng)，為每一株標(biāo)準(zhǔn)菌株建立詳細(xì)的電子檔案。記錄菌株的采集時(shí)間、地點(diǎn)、采集人、原始樣本信息、鑒定結(jié)果、保存和傳代記錄、分發(fā)去向等所有相關(guān)信息，形成完整的溯源鏈條。通過(guò)信息化系統(tǒng)，可以快速、準(zhǔn)確地查詢和追溯菌株的來(lái)源及歷史信息。

ATCC 的保藏資源為醫(yī)學(xué)研究提供了標(biāo)準(zhǔn)化、多樣化的生物材料，在疾病機(jī)制研究、藥物研發(fā)、臨床診斷和治療等方面發(fā)揮著關(guān)鍵作用，極大地推動(dòng)了醫(yī)學(xué)科學(xué)的發(fā)展和進(jìn)步。其對(duì)醫(yī)學(xué)研究的重要意義如下：
助力疾病機(jī)制研究
提供標(biāo)準(zhǔn)研究材料：ATCC 保藏了大量與人類疾病相關(guān)的微生物菌株和細(xì)胞系，如各種細(xì)菌、病毒、腫瘤細(xì)胞系等。這些標(biāo)準(zhǔn)材料為全球科研人員提供了統(tǒng)一的研究對(duì)象，確保研究結(jié)果的可比性和重復(fù)性。例如，研究人員在研究艾滋病病毒（HIV）的致病機(jī)制時(shí)，可使用 ATCC 提供的標(biāo)準(zhǔn) HIV 毒株，在不同實(shí)驗(yàn)室開展研究，從而更深入、全面地了解病毒的感染、復(fù)制以及對(duì)免疫系統(tǒng)的破壞機(jī)制。
模擬疾病發(fā)生發(fā)展過(guò)程：利用 ATCC 保藏的細(xì)胞系和動(dòng)物模型，能夠在實(shí)驗(yàn)室條件下模擬人類疾病的發(fā)生、發(fā)展過(guò)程。比如，通過(guò)將 ATCC 的腫瘤細(xì)胞系接種到免疫缺陷小鼠體內(nèi)，建立腫瘤移植模型，研究腫瘤的生長(zhǎng)、侵襲和轉(zhuǎn)移規(guī)律，以及腫瘤與宿主免疫系統(tǒng)之間的相互作用，為揭示腫瘤發(fā)生的分子機(jī)制提供重要線索。
加速藥物研發(fā)進(jìn)程
藥物靶點(diǎn)發(fā)現(xiàn)：ATCC 的細(xì)胞系和微生物菌株可用于藥物靶點(diǎn)的篩選和發(fā)現(xiàn)。通過(guò)對(duì)這些生物材料進(jìn)行基因表達(dá)分析、蛋白質(zhì)組學(xué)研究等，能夠確定與疾病發(fā)生、發(fā)展密切相關(guān)的關(guān)鍵分子靶點(diǎn)。例如，在研究乳腺癌細(xì)胞系時(shí)，發(fā)現(xiàn)某些基因的異常表達(dá)與癌細(xì)胞的增殖和存活密切相關(guān)，這些基因產(chǎn)物就有可能成為治療乳腺癌的潛在藥物靶點(diǎn)。
藥物篩選與評(píng)估：ATCC 的保藏資源為藥物篩選提供了豐富的模型。研究人員可以利用微生物菌株篩選抗菌、抗病毒藥物，利用腫瘤細(xì)胞系篩選抗腫瘤藥物等。通過(guò)觀察藥物對(duì)這些生物材料的生長(zhǎng)、代謝、基因表達(dá)等方面的影響，快速評(píng)估藥物的療效和安全性。例如，使用 ATCC 的多種腫瘤細(xì)胞系進(jìn)行體外藥物敏感性試驗(yàn)，篩選出對(duì)特定腫瘤細(xì)胞具有抑制作用的化合物，為進(jìn)一步的藥物研發(fā)提供基礎(chǔ)。
推動(dòng)臨床診斷技術(shù)發(fā)展
質(zhì)量控制標(biāo)準(zhǔn)：ATCC 的微生物菌株作為標(biāo)準(zhǔn)菌株，在臨床微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)室中廣泛應(yīng)用于質(zhì)量控制。實(shí)驗(yàn)室定期使用這些標(biāo)準(zhǔn)菌株對(duì)檢測(cè)方法、試劑和儀器進(jìn)行驗(yàn)證和校準(zhǔn)，確保檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確性和可靠性。例如，在進(jìn)行細(xì)菌鑒定和藥敏試驗(yàn)時(shí)，使用 ATCC 的標(biāo)準(zhǔn)菌株作為對(duì)照，可及時(shí)發(fā)現(xiàn)檢測(cè)過(guò)程中的誤差，保證臨床診斷的準(zhǔn)確性。
診斷試劑研發(fā)：ATCC 的生物材料為臨床診斷試劑的研發(fā)提供了重要的抗原、抗體來(lái)源。例如，利用 ATCC 保藏的病原體菌株制備特異性抗原，用于開發(fā)免疫診斷試劑，如酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（ELISA）試劑盒、免疫熒光檢測(cè)試劑等，實(shí)現(xiàn)對(duì)感染性疾病、自身免疫性疾病等的快速、準(zhǔn)確診斷。
促進(jìn)細(xì)胞治療與基因治療研究
細(xì)胞治療：ATCC 保藏的正常細(xì)胞系和干細(xì)胞系為細(xì)胞治療研究提供了重要的種子細(xì)胞。例如，間充質(zhì)干細(xì)胞系可用于研究細(xì)胞替代治療、組織工程等領(lǐng)域，為治療多種難治性疾病提供新的思路和方法。通過(guò)對(duì)這些細(xì)胞的培養(yǎng)、擴(kuò)增和定向分化研究，有望開發(fā)出基于細(xì)胞治療的新型療法，如治療心肌梗死、神經(jīng)退行性疾病等。
基因治療：ATCC 的細(xì)胞系可作為基因治療的載體和靶細(xì)胞。研究人員可以利用這些細(xì)胞系研究基因載體的轉(zhuǎn)染效率、基因表達(dá)調(diào)控以及基因治療的安全性和有效性等問(wèn)題。例如，將攜帶治療基因的載體導(dǎo)入 ATCC 的腫瘤細(xì)胞系中，觀察基因治療對(duì)腫瘤細(xì)胞生長(zhǎng)的抑制作用，為臨床基因治療腫瘤提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。


以下幾類微生物資源常用于生物肥料的研發(fā)：
固氮微生物
根瘤菌：與豆科植物共生，能侵入豆科植物根部形成根瘤，將空氣中的氮?dú)廪D(zhuǎn)化為氨，供植物吸收利用。不同的豆科植物有與之特異性共生的根瘤菌，如大豆根瘤菌與大豆共生，苜蓿根瘤菌與苜蓿共生。
自生固氮菌：能獨(dú)立生活在土壤中進(jìn)行固氮，如圓褐固氮菌。它在土壤中能固定空氣中的氮素，同時(shí)還能產(chǎn)生生長(zhǎng)素，促進(jìn)植物的生長(zhǎng)和發(fā)育。
聯(lián)合固氮菌：這類微生物與植物根系形成緊密的聯(lián)合關(guān)系，但不形成根瘤。例如，巴西固氮螺菌能在禾本科植物根系周圍生長(zhǎng)并固氮，為植物提供氮素營(yíng)養(yǎng)。
解磷微生物
芽孢桿菌屬：如巨大芽孢桿菌、蠟樣芽孢桿菌等，能分泌酸性磷酸酶、植酸酶等，將土壤中難溶性的有機(jī)磷和無(wú)機(jī)磷轉(zhuǎn)化為可被植物吸收的可溶性磷。
假單胞菌屬：該屬的一些菌株具有較強(qiáng)的解磷能力，通過(guò)產(chǎn)生有機(jī)酸等物質(zhì)溶解土壤中的磷礦石，提高土壤磷的有效性。
解鉀微生物
硅酸鹽細(xì)菌：又稱鉀細(xì)菌，如膠質(zhì)芽孢桿菌。它能分解土壤中含鉀的礦物質(zhì)，如長(zhǎng)石、云母等，釋放出鉀離子，供植物吸收利用，同時(shí)還能產(chǎn)生一些生物活性物質(zhì)，促進(jìn)植物生長(zhǎng)。
其他有益微生物
叢枝菌根真菌：能與大多數(shù)植物根系形成共生體，其菌絲可以延伸到土壤中較遠(yuǎn)的地方，擴(kuò)大植物根系的吸收范圍，幫助植物吸收更多的水分、氮、磷、鉀等養(yǎng)分，提高植物的抗逆性和抗病能力。
放線菌：一些放線菌可以產(chǎn)生抗生素和生長(zhǎng)激素，抑制土壤中的有害微生物，促進(jìn)植物生長(zhǎng)，同時(shí)還能參與土壤中有機(jī)物的分解和轉(zhuǎn)化，改善土壤結(jié)構(gòu)。

使用 - 80℃冰箱保存 ATCC 菌株時(shí)，需要注意以下幾個(gè)方面的問(wèn)題：
菌株準(zhǔn)備
菌液濃度：確保用于保存的菌株處于對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期，此時(shí)的菌株活力較強(qiáng)。一般來(lái)說(shuō)，菌液濃度應(yīng)達(dá)到一定標(biāo)準(zhǔn)，例如對(duì)于細(xì)菌，通常要求菌液的 OD 值（光密度）在 0.6 - 0.8 左右，以保證有足夠數(shù)量的活菌用于長(zhǎng)期保存。
保護(hù)劑使用：添加合適的保護(hù)劑是非常關(guān)鍵的。常用的保護(hù)劑如甘油，其終濃度一般在 15% - 30% 之間。甘油濃度過(guò)高可能會(huì)對(duì)菌株產(chǎn)生毒性，過(guò)低則不能有效保護(hù)菌株免受冷凍損傷。在添加甘油時(shí)，要確保其與菌液充分混合均勻。
凍存管選擇
材質(zhì)與質(zhì)量：應(yīng)選用高質(zhì)量、耐低溫的凍存管，通常由聚丙烯等材質(zhì)制成。優(yōu)質(zhì)的凍存管具有良好的密封性和耐低溫性能，能防止在 - 80℃環(huán)境下破裂或泄漏。
規(guī)格合適：根據(jù)菌株的量選擇合適規(guī)格的凍存管，一般常用的有 1.5 mL 或 2.0 mL 的凍存管，避免使用過(guò)大或過(guò)小的凍存管，以保證菌液在管內(nèi)有合適的空間，且便于凍存和復(fù)蘇操作。
冷凍過(guò)程
緩慢降溫：為了減少冰晶對(duì)菌株細(xì)胞的損傷，應(yīng)采用緩慢降溫的方式。可以將裝有菌株的凍存管先放入 - 20℃冰箱中預(yù)冷 2 - 4 小時(shí)，然后再轉(zhuǎn)移至 - 80℃冰箱。也可以使用專門的冷凍盒，如含有異丙醇的梯度冷凍盒，它能以相對(duì)均勻的速度降溫，使菌株更好地適應(yīng)低溫環(huán)境。
避免反復(fù)凍融：盡量避免對(duì)同一管菌株進(jìn)行多次凍融，因?yàn)槊看蝺鋈谶^(guò)程都可能對(duì)菌株造成損傷，導(dǎo)致菌株活力下降或基因突變。如果需要使用多支凍存管中的菌株，應(yīng)分別取出解凍，而不是將一支凍存管反復(fù)凍融。
冰箱維護(hù)與管理
溫度監(jiān)測(cè)：定期監(jiān)測(cè) - 80℃冰箱的溫度，確保其溫度穩(wěn)定在 - 80℃左右，波動(dòng)范圍最好控制在 ±5℃以內(nèi)。可以使用溫度記錄儀或溫度計(jì)進(jìn)行監(jiān)測(cè)，并做好記錄。如果發(fā)現(xiàn)溫度異常，應(yīng)及時(shí)查找原因并進(jìn)行修復(fù)。
定期除霜：冰箱內(nèi)的霜層會(huì)影響制冷效果，因此需要定期除霜。除霜時(shí)應(yīng)注意避免對(duì)菌株造成影響，可以將菌株暫時(shí)轉(zhuǎn)移至其他備用的 - 80℃冰箱或液氮罐中，待除霜完成、冰箱恢復(fù)正常溫度后再放回。
空間規(guī)劃：合理規(guī)劃冰箱內(nèi)的空間，將不同類型或來(lái)源的菌株分類存放，并做好標(biāo)記。可以使用凍存架或凍存盒進(jìn)行整理，以便于查找和取用菌株。同時(shí)，要留出一定的空間用于空氣流通，以保證制冷效果均勻。
記錄與標(biāo)識(shí)
詳細(xì)記錄：建立詳細(xì)的菌株保存記錄，包括菌株的名稱、ATCC 編號(hào)、保存日期、保存條件、凍存管數(shù)量等信息。記錄還應(yīng)包括菌株的來(lái)源、相關(guān)的實(shí)驗(yàn)記錄以及任何與菌株特性變化有關(guān)的信息，以便在需要時(shí)進(jìn)行查詢和追溯。
清晰標(biāo)識(shí)：在凍存管上用防水、耐低溫的標(biāo)記筆清晰地標(biāo)注菌株的名稱、ATCC 編號(hào)、保存日期等關(guān)鍵信息。也可以使用標(biāo)簽貼紙，但要確保貼紙?jiān)诘蜏丨h(huán)境下不會(huì)脫落或模糊。此外，還可以在凍存架或凍存盒上進(jìn)行標(biāo)識(shí)，方便快速定位所需菌株。