F 的鈣熒光探針
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| 類別 | 黃頁 儀器儀表網(wǎng) | 來源 | 經(jīng)紀人 |
F 的鈣熒光探針
Fluo-4, AMCAS#：273221-67-3中文名：鈣熒光探針 Fluo-4, AM分子式：C51H50F2N2O23分子量：1096.94性質：1. 外觀：橙紅色粉末2. 純度：≥90%（HPLC）3. 產品描述： Fluo-4 是一種將 Fluo-3 結構中的 Cl 替換成 F 的鈣熒光探針。由于將 Cl 替換成了電子吸引力更強的 F，它的大激發(fā)波長會向短波長處偏離 10 nm 左右。這個波長更接近于氬激光器的波長，所以用氬激光器激發(fā)時，F(xiàn)luo-4 的熒光強度比 Fluo-3 強一倍。Fluo-4, AM 穿透細胞膜進入細胞后被細胞內的酯酶剪切形成 Fluo-4，從而被滯留在細胞內，F(xiàn)luo-4 若以游離配體形式存在時幾乎是非熒光性的，但是當它與細胞內鈣離子結合后可以產生較強的熒光，大激發(fā)波長為 494nm，大發(fā)射波長為 516nm。可以使用激光共聚焦顯微鏡或流式細胞儀檢測細胞內鈣離子濃度的變化。4. 操作說明（for Human T cells）*（1） 試劑
2 mM 的 Fluo-4, AM/DMSO（將 1mg Fluo-4, AM 溶于 442μL DMSO） Pluronic F127
Hanks?balanced salt solution（HBSS）HEPES buffer saline（10mM HEPES，1mM Na2HPO4，137mM NaCl，5mM KCl，1mM CaCl2， 0.5mM MgCl2，5mM glucose，0.1% BSA，pH 7.4）(2） 操作①. 向Fluo-4, AM/DMSO 溶液中加入16.5mg Pluronic F127，Pluronic F127 可以 防止Fluo-4, AM 在 HBSS 中聚合并能幫助其進入細胞。②. 用 HBSS 稀釋 Fluo-4, AM 溶液，制備 4μM 的 Fluo-4, AM 工作液。 ③. 將 Fluo-4, AM 工作液加入細胞，在 37℃培養(yǎng) 20 分鐘。④. 加入 5 倍體積的含有 1%胎牛血清的 HBSS，再繼續(xù)培養(yǎng) 40 分鐘。⑤. 用HEPES buffer saline 洗滌細胞3 次，然后用HEPES buffer saline 使細胞重懸浮，制成1×105cells/mL 的溶液。⑥. 37℃下培養(yǎng) 10 分鐘，然后用該細胞進行熒光鈣離子檢測。激發(fā)波長 494nm，發(fā)射波長
516nm。
*標記的條件因細胞種類而異，在每次實驗前，請先確定佳條件。以上方法僅供參考。 儲存條件：-20℃干燥避光保存，有效期一年。
2）確認收貨前請仔細核驗產品質量，避免出現(xiàn)以次充好的情況。
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